Die Stabilität von RNA ist stark temperaturabhängig, wobei die Abbaugeschwindigkeit je nach Lagerungsbedingungen erheblich variiert.Während RNA bei extrem niedrigen Temperaturen (-20°C bis -80°C) über längere Zeit stabil bleibt, nimmt ihre Integrität bei höheren Temperaturen, insbesondere über 4°C, zunehmend ab.Eine kurzzeitige Lagerung bei Raumtemperatur ist möglich, birgt aber im Vergleich zu gekühlten oder gefrorenen Bedingungen ein höheres Risiko des Abbaus.
Die wichtigsten Punkte werden erklärt:
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Ultra-Tieftemperatur-Lagerung (-20°C bis -80°C)
- RNA bleibt für Monate bis Jahre stabil, wenn sie bei -20°C oder -80°C gelagert wird.
- Wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen (bis zu 10 Mal) beeinträchtigen die RNA nicht wesentlich, so dass diese Temperaturen ideal für die Langzeitkonservierung sind.
- Frostfreie Gefrierschränke sollten jedoch aufgrund von Temperaturschwankungen, die die Stabilität beeinträchtigen können, vermieden werden.
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Gekühlte Lagerung (4°C)
- Die RNA kann bei 4°C bis zu 14 Tage lang gelagert werden, ohne dass es zu einem signifikanten Abbau kommt.
- Im Laufe der Zeit kann es zu einer Verdunstung der Lagerungspuffer kommen, daher wird empfohlen, die Röhrchen fest zu verschließen.
- Geeignet für kurzfristige Experimente, aber nicht ideal für eine längere Lagerung.
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Raumtemperatur (20-25°C)
- RNA bleibt bei Raumtemperatur etwa 48 Stunden lang stabil, aber das Risiko des Abbaus steigt über dieses Zeitfenster hinaus.
- Eine RNase-Kontamination oder die Einwirkung von UV-Licht kann den Abbau beschleunigen, daher sind Vorsichtsmaßnahmen bei der Handhabung wichtig.
- Am besten für die sofortige Verarbeitung und nicht für die Lagerung geeignet.
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Kritische Faktoren, die die RNA-Stabilität beeinflussen
- RNase-Kontamination:Selbst Spuren von RNasen können RNA schnell abbauen, daher ist die Verwendung von RNase-freien Röhrchen und Reagenzien unerlässlich.
- Puffer-Zusammensetzung:Die Lagerung in RNase-hemmenden Puffern (z. B. TE-Puffer oder kommerzielle RNA-Stabilisierungslösungen) erhöht die Stabilität.
- Probenkonzentration:Verdünnte RNA baut sich schneller ab; konzentrierte Proben sind widerstandsfähiger.
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Praktische Empfehlungen für Einkäufer
- Prioritäten setzen RNase-freie Verbrauchsmaterialien (Röhrchen, Spitzen), um das Kontaminationsrisiko zu minimieren.
- Für Labore ohne Ultratiefkühlschränke, RNA-Stabilisierungsreagenzien (z. B. RNA later) können die Stabilität bei Raumtemperatur erhöhen.
- Erwägen Sie lyophilisierte RNA für Anwendungen, die eine Lagerung bei Raumtemperatur erfordern, da sie dem Abbau besser widersteht als flüssige Proben.
Durch das Verständnis dieser temperaturabhängigen Stabilitätsprofile können Forscher und Einkäufer fundierte Entscheidungen über die Handhabung von RNA, Lagerungsausrüstung und Verbrauchsmaterialien treffen, um die Integrität der Proben zu gewährleisten.
Zusammenfassende Tabelle:
| Lagertemperatur | Stabilität Dauer | Wichtige Überlegungen |
|---|---|---|
| -20°C bis -80°C | Monate bis Jahre | Frostfreie Gefrierschränke vermeiden; auch nach mehreren Gefrier-Auftau-Zyklen stabil. |
| 4°C (gekühlt) | Bis zu 14 Tage | Röhrchen fest verschließen, um eine Verdunstung des Puffers zu verhindern. |
| Raumtemperatur (20-25°C) | ~48 Stunden | Hohes Degradationsrisiko; RNase-freie Handhabung verwenden. |
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